PE紫外分光光度計(jì)是化學(xué)、生物醫(yī)藥、環(huán)境科學(xué)等領(lǐng)域廣泛應(yīng)用的精密分析儀器,其核心原理基于比爾-朗伯定律(Beer-Lambert Law),即物質(zhì)對(duì)特定波長(zhǎng)光的吸收強(qiáng)度與其濃度和光程長(zhǎng)度成正比。該儀器通過(guò)測(cè)量樣品在紫外-可見(jiàn)光波段(通常190-1100nm)的吸收光譜,實(shí)現(xiàn)物質(zhì)的定量分析、定性鑒別及結(jié)構(gòu)研究。其采用雙光束或雙單色器設(shè)計(jì),結(jié)合涂覆SiO?保護(hù)層的全息刻線光柵(刻線密度達(dá)1440條/mm),確保波長(zhǎng)精度高達(dá)±0.08nm(紫外/可見(jiàn)區(qū)),有效消除雜散光干擾(雜散光≤0.00007%T)。
PE紫外分光光度計(jì)在操作前的檢查與準(zhǔn)備是避免誤差和儀器故障的關(guān)鍵,需重點(diǎn)關(guān)注以下幾點(diǎn):
1、儀器狀態(tài)與環(huán)境確認(rèn)
檢查儀器外觀:確認(rèn)主機(jī)、光源燈(氘燈用于紫外區(qū)、鎢燈用于可見(jiàn)區(qū))、比色皿架、數(shù)據(jù)線等部件無(wú)破損、松動(dòng),電源線連接牢固。
環(huán)境要求:儀器需置于恒溫(20-25℃,波動(dòng)≤±2℃)、恒濕(相對(duì)濕度40%-65%)、無(wú)強(qiáng)光直射、無(wú)劇烈振動(dòng)、無(wú)腐蝕性氣體的環(huán)境中,避免靠近熱源(如烘箱)或水源(如水槽),防止溫濕度波動(dòng)影響光路穩(wěn)定性。
預(yù)熱要求:開(kāi)機(jī)前需確認(rèn)儀器已通電預(yù)熱(不同型號(hào)略有差異,通常氘燈需預(yù)熱30-60分鐘,鎢燈需預(yù)熱15-30分鐘),待光源能量穩(wěn)定后再進(jìn)行后續(xù)操作(可通過(guò)儀器自檢界面查看光源能量值,需符合儀器規(guī)定范圍,如氘燈在254nm處能量≥80%)。
2、試劑與樣品準(zhǔn)備
試劑純度:空白溶劑、標(biāo)準(zhǔn)品需符合分析要求(如色譜純、分析純),避免雜質(zhì)干擾;標(biāo)準(zhǔn)品需在有效期內(nèi),且按規(guī)定濃度準(zhǔn)確配制(配制過(guò)程需使用校準(zhǔn)過(guò)的移液管、容量瓶,確保濃度誤差≤±0.1%)。
樣品處理:樣品需澄清、無(wú)懸浮物(若有渾濁需通過(guò)離心、過(guò)濾等方式預(yù)處理,過(guò)濾時(shí)需使用與樣品不反應(yīng)的濾膜,如水系濾膜用于水溶液、有機(jī)系濾膜用于有機(jī)溶劑),避免顆粒物堵塞比色皿或散射光線導(dǎo)致吸光度偏差。
一致性原則:空白溶劑、標(biāo)準(zhǔn)品、樣品需使用相同批次、相同純度的溶劑配制,且溫度需與儀器環(huán)境溫度一致(避免溫差導(dǎo)致溶劑體積變化,影響濃度準(zhǔn)確性)。
3、比色皿檢查與清潔
材質(zhì)匹配:紫外區(qū)(200-400nm)需使用石英比色皿(玻璃比色皿會(huì)吸收紫外光,僅適用于可見(jiàn)區(qū)400-760nm),使用前需確認(rèn)比色皿透光面無(wú)劃痕、無(wú)裂紋(劃痕會(huì)導(dǎo)致光散射,影響吸光度重復(fù)性)。
清潔干燥:比色皿需用空白溶劑反復(fù)沖洗3-5次,再用無(wú)水乙醇或丙酮潤(rùn)洗(針對(duì)有機(jī)溶劑樣品),最后用鏡頭紙或無(wú)絨軟布吸干外壁水分(避免殘留液滴形成光斑,禁止擦拭透光面內(nèi)側(cè));若有油污或頑固污漬,可用5%硝酸溶液浸泡10-15分鐘后沖洗,禁止使用毛刷或硬布擦拭透光面。